بررسی اثرات کادمیوم، سرب و مس بر فعالیت آنزیم میلوپراکسیداز تلخیص شده از لکوسیتهای خون انسانی

/مریم شعبانی; ؛ ضیاالدین صمصام شریعت، محسن آنی، احمد موحدیان عطار

خط مشی دسترسی

فارسی

X

X

جستجوی مدارک

X

تمام متن

X

منابع دیجیتالی

نام مرکز	:	دانشگاه علوم پزشکی اصفهان
نوع مدرک	:	پایان نامه فارسی
زبان مدرک	:	فارسی
شماره رکورد	:	100316
شماره مدرک	:	‭ت۱۲۴۳۲‬
شماره راهنما	:	‭QU،۱۴۰،ش۵۱۲ب،۱۳۸۹‬
سرشناسه	:	شعبانی، مریم
عنوان	:	بررسی اثرات کادمیوم، سرب و مس بر فعالیت آنزیم میلوپراکسیداز تلخیص شده از لکوسیتهای خون انسانی [پایان‌نامه]
نویسنده	:	/مریم شعبانی
استاد راهنما	:	؛ ضیاالدین صمصام شریعت، محسن آنی، احمد موحدیان عطار
محل تحصیل	:	دانشکده داروسازی
سال تحصیل	:	، ‭۱۳۸۹‬
مقطع تحصیلی	:	رشته داروسازی، دکترای حرفه‌ای
تاریخ دفاع	:	‭1389/07/29‬
صفحه شمار	:	‮ذ، ‭۹۱‬ ص.‬: مصور (رنگی) ، جدول، نمودار
يادداشت	:	این یک پایان نامه تحقیقاتی با شماره‭ ۳۸۸۳۰۲ ‬است
يادداشت	:	چاپی
چکيده	:	میلوپراکسیداز آنزیمی هم‌دار که به مقدار فراوان در گرانولهای آزروفیلیک نتروفیلها و مونوسیتها وجود دارد و از گرانولها در پاسخ به التهاب یا عفونت به فضای خارج سلولی یا فاگولیزوزومال آزاد می شود. فانکشن اصلی ‭MPO‬ دفاع میزبان در از بین بردن عوامل عفونی است جزء خانواده پراکسیدازها می باشد که با استفاده زا ‭H2O2‬ تولید هیپوکلرویت اسید ‭(HOCI)‬ را می کند که یک اکسیدان قوی می باشد. مطالعات نشان می دهد که میلوپرکسیداز در شروع و پیشرفت ضایعات آترواسکلروزیس نقش دارد. میلوپرکسیداز ‭(MPO)‬ سبب کلرینه کردن ‭LDL‬ شده و آنرا بصورت ‭Ox-LDL‬ در می آورد از طرفی مس بعنوان کوفاکتور ضروری در واکنش‌ها متابولیکی می باشد و کمبود آن طیف وسیعی از بیماریهای قلبی عروقی را سبب می شود و همچنین سرب و کادمیوم جز فلزات سنگین و آلاینده های محیط زیست هستند و بعنوان ریسک فاکتورهای آترواسکلروزیس شناخته شده‌اند. در این تحقیق اثرات این فلزات بر فعالیت آنزیم میلوپراکسیداز مورد بررسی قرار گرفت. ابتدا تخلیص نسبی آنزیم میلوپراکسیداز از لکوسیتهای خون انسانی انجام شد و سپس تعیین میزان فعالیت آنزیم با سوبسترای تترا متیل بنزیدین و ‭H2O2‬ در طول موج‭ ۶۵۵ ‬نانومتر در بافر استات سدیم‭ ۵۰ ‬میلی مولار با ‭pH=5‬ صورت گرفت، فعالیت ویژه آن محاسبه گردید و درجه خلوص ‭RZ‬ از نسبت جذب در‭ ۴۳۰ ‬به‭ ۲۸۰ ‬که مخصوص پراکسیدازها می باشد بدست آمد و سپس فعالیت آنزیم در حضور غلظت‌های مختلف عناصر مس، سرب و کادمیوم سنجیده شد. تغییرات فعالیت آنزیم در مدت‭ ۳ ‬دقیقه بصورت خطی بود و فعالیت ویژه آن ‭ ۲۱/۷۴IU/mg‬و درجه خلوص آن‭ ۰/۶۱ ‬بود. فعالیت آنزیم در حضور این عناصر و زمانهای انکوباسیون‭ ۳۰ ،۵ ،۱۰ ‬دقیقه سنجیده شد و مس در غلظت های ‭(0.5 mM-70 mM)‬ سبب مهار آنزیم گردید. نمودار لینویور- برک در حضور آنزیم و مس رسم شد، مهار از نوع غیررقابتی بود. مهار اکسید شدن ‭TMB‬ بیشتر وابسته به غلظت بود تا به زمان انکوباسیون در حالی که کادمیوم و سرب هیچگونه تغییر را در فعالیت آنزیم ایجاد نکردند. با توجه به الگوی مهاری آنزیم در حضور مس به نظر می‌رسد کاتیون مس می تواند هم به آنزیم و هم به کمپلکس آنزیم- سوبسترا متصل شود احتمال می رود که بر روی آنزیم آزاد و کمپلکس آنزیم- سوبسترا جایگاهی برای کاتیون مس وجود دارد که باند شدن مس به آن ممکن است باعث تغییر در شکل فضایی آنزیم شده که از نظر کاتالیتیک فعالیتی نداشته باشد. آنزیم دارای گروههای سولفیدریل می باشد که ممکن است مس با آنها واکنش دهند و تغییر در ساختار فضایی آنزیم میلوپراکسیداز را موجب شده و جایگاه فعال آنرا برای سوبسترای تترامتیل بنزیدین دستخوش تغییر دهند و بی‌تاثیری عناصر سرب و کادمیوم بر فعالیت ‭MPO‬ ممکن است بدلیل بزرگ بودن شعاع یونی آنها نسبت به مس باشد و آنها نتوانند به مکان فعال آنزیم دسترسی یابند
توصیفگر	:	۱. اکسیدوردوکتازها.- کلیدواژه ها: اکسیدوردوکتازها
	:	کادمیوم
	:	سرب
	:	مس
	:	گلبولهای سفید
	:	فعال شدن آنزیم
	:	Oxidoreductases
	:	Cadmium
	:	Lead
	:	Copper
	:	Leukocytes
	:	Enzym Activation
شناسه افزوده	:	صمصام شریعت، ضیاالدین، استاد راهنما
	:	آنی، محسن، استاد راهنما
	:	موحدیان عطار، احمد، استاد راهنما
شناسه افزوده	:	دانشکده داروسازی