This page uses JavaScript and requires a JavaScript enabled browser.Your browser is not JavaScript enabled.
This page uses JavaScript and requires a JavaScript enabled browser.Your browser is not JavaScript enabled.
خط مشی دسترسی
درباره ما
ثبت نام
راهنما
فارسی
ورود
صفحه اصلی
X
جستجو
X
جستجوی مدارک
X
تمام متن
X
منابع دیجیتالی
جستجوی مدارک
تمام متن
منابع دیجیتالی
گالری
کتابخانه شخصی
پرسش و پاسخ
تازه ها
خطا
رکورد قبلی
رکورد بعدی
نام مرکز
:
دانشگاه علوم پزشکی اصفهان
نوع مدرک
:
پایان نامه فارسی
زبان مدرک
:
فارسی
شماره رکورد
:
101421
شماره مدرک
:
ت۱۳۵۷۱
شماره راهنما
:
QW،۸۰۰،الف۷۳۲ب،۱۳۹۱
سرشناسه
:
القاصی، ناهید
عنوان
:
بررسی تاثیر شرایط مختلف محیط کشت در بهینهسازی تولید hIFN-B در سلولهای CHO- DHFR [پایاننامه]
نویسنده
:
/ناهید القاصی
استاد راهنما
:
؛ حسن کربکندی، بتول هاشمیبنی
استاد مشاور
:
؛ زهره حجتی
محل تحصیل
:
دانشکده پزشکی
سال تحصیل
:
، ۱۳۹۱
مقطع تحصیلی
:
رشته زیست فنآوری پزشکی، کارشناسی ارشد
صفحه شمار
:
ط،۵۹ ،۲۰ ص.: جدول، نمودار
يادداشت
:
این یک پایاننامه تحقیقاتی به شماره ۳۹۰۵۱۳ میباشد
يادداشت
:
چاپی
چکيده
:
تقویت بیان پروتئینهای نوترکیب در سل لاینهای ترانسفکت شده برای توسعه bioprocess موثر در مقیاس بزرگ ضروری است. بهینهسازی تولید اینترفرون بتا در سلولهای CHO به عنوان یک میزبان بیانی که قادر به تولید پروتئین دارویی با کیفیت بالا میباشد، جهت کاهش قیمت تمام شده این پروتئین نوترکیب دارویی از اهمیت زیادی برخوردار است. هدف از این تحقیق بررسی تاثیر شرایط مختلف محیط کشت شامل ۴ فاکتور سدیم بوتیرات، سولفات روی، اسمولالیته و دما در بهینهسازی تولید hIFN-B در سلولهای CHO-DHFR بود. از پلاسمید حاوی ژن اینترفرون بتای انسانی که توالی Koak برای بهبود بیان ژن به آن اضافه شده بود استفاده گردید این پلاسمید در باکتری E.coli -XL blue ترانسفورم گردید و تکثیر داده شد. پلاسمیدها با استفاده از کیت Genetbio (K-1000) استخراج گردیدند و غلظت و خلوص آنها بوسیله نانو اسپکتروفتومتر اندازهگیری شد. سلولهای CHO-HFR از انستیتو پاستور خریداری شدند و در محیط کشت DMEM High Glucose حاوی متوتروکسات، هیپوگزانتین و تیمیدین که به آن FSB و استرپتومایسین و پنیسیلین اضافه شده بود کشت داده شدند این سلولها با پلاسمیدهای مذکور و با استفاده از کیت Express in(ETR4621) ترانسفکت شدند. ۴ عامل بر اساس منابع بیشترین تاثیر را در تولید اینترفرون بتا داشتند به روش کسری از فاکتوریل کامل تاگوچی و به وسیله نرمافزار Minitab 16 به گونهای مورد طراحی آزمایش قرار گرفتند که با انجام ۹ آزمایش تجربی بتوان به جای ۸۱ آزمایش، ترکیب بهینه آنها برای تولید حداکثر را بدست آورد ۹ محیط کشت مختلف با شرایط طراحی شده ساختهشدند و سلولهای ترانسفکت شده در آنها کشت داده شد. میزان فرم فعال اینترفرون بتای انسانی تولید شده در هر ۹ محیط کشت و شرایط به وسیلهELISA(Invitrogene KAC 1201) تعیین گردید و اعداد به دست آمده وارد نرمافزار گردید و نرمافزار ترکیب بهینه را اعلام نمود. ترکیب پیشنهادی توسط آزمایش تجربی تایید گردید. اثرات هر کدام از کشتها بر روی تکثیر و فعالیت سلولی به روش MTT assay اندازهگیری گردید. پلاسمید حاوی ژن اینتر فرون بتای انسانی با موفقیت تکثیر گردید و در سلولهای CHO ترانسفورم شد. بهترین ترکیب عوامل مهم در کشت سلولهای ترانسفکت شده برای تولید حداکثر غلظت اینترفرون بتا با استفاده از روش تاگوچی به شرح زیر بود: سدیم بوتیرات (۳(mM، سولفات روی(mM۱۲۵)، دما۳۰)درجه سانتیگراد)، اسمولالیته (mosm/kg۵۰۰) بر اساس خروجی برنامه رتبه تاثیرگذاری این متغیرها به ترتیب شامل غلظت سدیم بوتیرات، غلظت سولفات روی، اسمولالیته و دما بود. همه محیط کشتها و شرایط آزمایش شده به غیر از محیط کشت استاندارد معرفی شده از طرف کلکسیون سلولی شوکی به سلولها وارد میکردند و فعالیت سلولها و زنده ماندن آنها را کاهش میداند میزان viability سلولها در کشت بهینه ۵۱ درصد بود
توصیفگر
:
۱. اینترفرون ها.- کلیدواژهها: اینترفرونها
:
محیط کشت
:
انتقال ژن
:
پروتئینهای بهم پیوسته نوترکیب
:
Interferons
:
Culture Media
:
Transfection
:
Recombinant Fusion Protein
شناسه افزوده
:
کربکندی، حسن، استاد راهنما
:
هاشمیبنی، بتول، استاد راهنما
:
حجتی، زهره، استاد مشاور
شناسه افزوده
:
دانشکده پزشکی
http://elib.mui.ac.ir/site/catalogue/101421
آدرس ثابت
پیشنهاد خرید
نقد
|
پیوستها
|
موجودی
|
نظرسنجی
عنوان :
نام فایل :
نوع عام محتوا :
نوع ماده :
فرمت :
سایز :
عرض :
طول :
بررسی تاثیر شرایط مختلف محیط کشت در بهینهسازی تولید hIF...
alghasi nahida.pdf
پایان نامه فارسی
متن
application/force-download
371 KB
85
85
نمایش
دانلود
کلیه حقوق معنوی این نرم افزار متعلق به شرکت پارس آذرخش می باشد