بررسی تنوع مایکوباکتریوم‌های آتیپیک موجود در منابع آبی بیمارستان های شهر اصفهان با استفاده از ‭16SrD...

منو

" بررسی تنوع مایکوباکتریوم‌های آتیپیک موجود در منابع آبی بیمارستان های شهر اصفهان با استفاده از ‭16SrDNA sequencing‬ "
/داود آزادی ؛ حسن شجاعی

نام مرکز	:	دانشگاه علوم پزشکی اصفهان
نوع مدرک	:	پایان نامه فارسی
زبان مدرک	:	فارسی
شماره رکورد	:	101617
شماره مدرک	:	‭ت۱۴۰۷۲‬
شماره راهنما	:	‭QW،۱۲۵/۵،.M9،آ۴۷۵ب،۱۳۹۱‬
سرشناسه	:	آزادی، داود
عنوان	:	بررسی تنوع مایکوباکتریوم‌های آتیپیک موجود در منابع آبی بیمارستان های شهر اصفهان با استفاده از ‭16SrDNA sequencing‬ [پایان‌نامه]
نویسنده	:	/داود آزادی
استاد راهنما	:	؛ حسن شجاعی
محل تحصیل	:	دانشکده پزشکی
سال تحصیل	:	، ‭۱۳۹۱‬
مقطع تحصیلی	:	رشته میکروب شناسی پزشکی، کارشناسی ارشد
صفحه شمار	:	‮ ‭۹۹‬ص.‬: مصور، جدول
يادداشت	:	این یک پایان نامه تحقیقاتی با شماره‭ ۳۹۰۲۷۰ ‬است
يادداشت	:	چاپی
چکيده	:	در میان عوامل محیط زیستی، آب نقش عمده‌ای را به عنوان منبع و واسطه انتقال بسیاری از میکروارگانیسم ها ایفاء می‌کند. شواهد فزاینده‌ای وجود دارد که نشان می‌دهد هرگونه منابع آبی حتی آب لوله‌کشی می‌تواند حاوی مایکوباکتر آبوم ها بوده و به عنوان عامل انتقال عفونت به انسان تلقی گردند. در ایران جایی که همچنان بیماری سل چالشی بزرگ بوده و افراد زیادی را متاثر می سازد، انتظار می رود شیوع بیماری های ناشی از مایکوباکتریوم‌های غیر سلی در کنار افزایش ناگهانی بیماری‌های نقص سیستم ایمنی رو به افزایش باشد. تعداد‭ ۸۵ ‬نمونه آب در داخل ظروف یک لیتری که روی هر کدام خصوصیات منبع نمونه، نوع آب و ... نوشته شده بود جمع‌آوری گردید. کلر موجود در آب به وسیله اضافه نمودن‭ ۰/۴۶ ‬گرم سدیم تیوسولفات، داخل هر ظرف خنثی می‌گردید، دمای آب به وسیله دماسنج جیوه‌ای اندازه‌گیری می‌شد و در اسرع وقت به آزمایشگاه انتقال می‌یافت. نمونه آب به وسیله ستیل پیرادینیوم کلراید‭ ۰/۰۰۵ ‬آلودگی زدایی می‌گردید. سپس از فیلتر میلیپور ‭ ۰/۴۵ Mm‬گذرانده می‌شد و فیلتر را درون ‭ ۱۵ cc‬آب مقطر استریل قرار می‌گرفت و ورتکس می‌شد. سپس سانتریفیوژ کرده و رسوب حاصل بر روی محیط لوونشتین جانسون قرار می‌گرفت. ایزوله‌های جداشده مایکوباکتریوم های غیر سلی در ابتدا توسط تست های فنوتیپیک رایج مانند پیگمانتاسیون، سرعت رشد، نیاسین و کاتالاز کمی تا مرحله قرارگیری در گروه رانیون شناسایی شدند. سپس براساس روش های مولکولی شامل بررسی تعیین توالی و آنالیز قطعات ژنی ‭hsp65‬ و قطعه تقریبا کامل ژن ‭16SrRNA‬ مورد بررسی قرار گرفت. از مجموع‭ ۸۵ ‬نمونه که‭ ۵۸ ‬نمونه مربوط به آب شیر،‭ ۱۸ ‬نمونه از آب دوش و‭ ۹ ‬نمونه از آب چاه بودند از میان این‭ ۸۵ ‬نمونه تعداد‭ ۴۰ ‬ایزوله مایکوباکتریوم با استفاده از روش های فنوتیپی مرسوم و روش های مولکولی شامل ‭hsp65‬ و تعیین توالی ژن ‭16SrRNA‬ مورد شناسایی قرار گرفتند. براساس خصوصیات فنوتیپک و بیوشیمیایی از‭ ۴۰ ‬مایکوباکتریوم جداشده‭ ۱۵ ‬نمونه به رانیون گروه یک‭ ۱۱ ‬نمونه رانیون گروه دو و‭ ۱۴ ‬نمونه به رانیون گروه‭ ۴ ‬متعلق بودند. گونه‌های شناسایی شده شامل فوکائیکوم، م. کاناریسنسه، م. ستنسه، م. آستروافریکانوم، م. ماسلینسه، م. کوکی، م. نووکاسترنسه، م. فردیکسبرگنسه، م. گوردونه و یک گونه جدید با نام پیشنهادی م. سپاهانیکیوم بودند. شواهد متعددی دال بر ارتباط مایکوباکتریوم هیا موجود در آب بیمارستان ها با عفونت فرصت طلب بیماران وجود دارد و نگرانی در این زمینه رو به افزایش نیز می‌باشد. چرا که در سال های اخیر نقش مایکوباکتریوم های محیطی و به ویژه عوامل موجود در آب در ایجاد عفونت بیمارستانی بسیار پررنگ تر از گذشته شده است، تنوع بالای گونه‌های مایکوباکتریوم های غیر سلی ایجاد کننده بیماری در افراد سالم و دارای نقص ایمنی، هشداری جدی در مورد لزوم توجه مسئولین بهداشت جامعه است که اینگونه عفونت ها شیوع روزافزون داشته و محدود به کشورهای خاص نمی‌باشد. با توجه به شیوع بالا در منابع مختلف محیطی و همچنین پیچیده بودن شناسایی گونه‌های مایکوباکتریوم و دشوار بودن کنترل منابع آب بیمارستان ها از لحاظ حضور مایکوباکتریوم های غیر سلی ، توصیه می‌شود که توجه خاصی بر روی کنترل این منابع آبی و همچنین آزمایشگاه های مرتبط با تشخیص اینگونه باکتری ها ( عفونت های ناشی از مایکوباکتریوم های غیر سلی) در غالب آزمایشگاه های رفرانس منطقه‌ای متمرکز گردند. که به دین منظور استفاده از فیلتراسیون آب در منابع بیمارستانی و همچنین استفاده از مواد ضد عفونی کننده‌ای که بتوانند مانع رشد مایکوباکتریوم ها شوند پیشنهاد می‌گردد. شناسایی گونه در مایکوباکتریوم ها تنها براساس تست های فنوتیپیک و یا تعیین توالی ژن ‭16SrRNA‬ چندان قابل اتکا نیست. بدین منظور برای تشخیص مطمئن و کامل گونه‌های مایکوباکتریوم موجود در نمونه‌های کلینیکی و منابع مختلف محیطی به کار بردن حداقل‭ ۲ ‬روش فنوتیپی به همراه استفاده از آزمایشات بیوشیمیایی مرسوم برای شناسایی اولیه این گونه‌های میکروبی پیشنهاد می‌گردد
توصیفگر	:	۱. مایکوباکتری اتیپیکال.- کلیدواژه‌ها: مایکوباکتری غیر معمول
	:	مایکوباکتری عامل سل
	:	فنون تعیین نوع باکتری
	:	دی ان ا
	:	واکنش زنجیره‌ای پلیمراز
	:	انتشار عفونت
	:	آلودگی آب
	:	Mycobacterium, Atypical
	:	Mycobacterium Tuberculosis
	:	Bacteria typing Techniques
	:	DNA
	:	Polymerase Chain Reaction
	:	Cross Infection
	:	Water Pollution
شناسه افزوده	:	شجاعی، حسن، استاد راهنما
شناسه افزوده	:	دانشکده پزشکی