بررسی تنوع مایکوباکتریوم‌های آتیپیک موجود در خاک و گرد و غبار بیمارستانی و خانه های سالمندان شهر اصفهان با استفاده از ‭16SrDNA sequencing‬

/معصومه داورپناه; ؛ حسن شجاعی

خط مشی دسترسی

فارسی

X

X

جستجوی مدارک

X

تمام متن

X

منابع دیجیتالی

نام مرکز	:	دانشگاه علوم پزشکی اصفهان
نوع مدرک	:	پایان نامه فارسی
زبان مدرک	:	فارسی
شماره رکورد	:	101845
شماره مدرک	:	‭ت۱۴۴۴۶‬
شماره راهنما	:	‭.M9QW،۱۲۵/۵،.M9،د۳۱۵ب،۱۳۹۲‬
سرشناسه	:	داورپناه، معصومه
عنوان	:	بررسی تنوع مایکوباکتریوم‌های آتیپیک موجود در خاک و گرد و غبار بیمارستانی و خانه های سالمندان شهر اصفهان با استفاده از ‭16SrDNA sequencing‬ [پایان‌نامه]
نویسنده	:	/معصومه داورپناه
استاد راهنما	:	؛ حسن شجاعی
محل تحصیل	:	دانشکده پزشکی
سال تحصیل	:	، ‭۱۳۹۲‬
مقطع تحصیلی	:	رشته میکروب شناسی پزشکی، کارشناسی ارشد
صفحه شمار	:	‮ ‭۱۰۳‬ص.‬: مصور، جدول
يادداشت	:	این یک پایان نامه تحقیقاتی با شماره‭ ۳۹۰۳۸۹ ‬است
يادداشت	:	چاپی
چکيده	:	شناسایی مایکوباکتریوم های آتیپیک که منبع اصلی آنها محیط بوده و به طور فزاینده‌ای در سالهای اخیر ادامه یافته است. براساس آخرین اطلاعات موجود در بانک اطلاعاتی مایکوباکتریوم ها، این جنس امروزه بیش از‭ ۱۵۰ ‬گونه را در بر می‌گیرد. تعداد مایکوباکتریوم های شناخته شده در طول‭ ۱۵ ‬سال گذشته‭ ۲ ‬برابر شده است، تاییدی بر همین موضوع می باشد. در عین حال شواهد بالینی متعددی وجود دارد که نشان می‌دهد هرگونه منابع محیطی و به ویژه آب و خاک می توانند حاوی مایکوباکتریوم ها بوده و به عنوان منبع انتقال و انتشار عفونت به انسان تلقی می گردند. مایکوباکتریوم های آتیپیک می توانند در خاک زنده مانده و سپس از طریق گرد و غبار انتشار یابند و افرادی که به ویژه دارای شرایط زمینه‌ای خاص مانند ضعف سیستم ایمنی هستند را دچار عفونت نمایند. این گونه باکتری ها و عفونت های ناشی از آنها غالبا به جهت پیچیدگی، سرعت رشد آهسته و نیازهای کشت خاص با روشهای مرسوم میکروبیولوژیک شناسایی نشده و در نتیجه عفونت ناشی از آنها اغلب مورد غفلت قرار می گیرد. هدف از مطالعه‌ی حاضر، پی بردن به تنوع مایکوباکتریوم های غیر سلی موجود در منابع خاک و گرد و غبار محیط های بیمارستانی که سلامت بیماران را تهدید می‌کنند. تعداد‭ ۲۱۸ ‬نمونه از خاک و گرد و غبار بیمارستان و خانه های سالمندان در شهر اصفهان جمع آوری شد و توسط ستیدیل پیرادینیوم کلراید‭ ۰/۵ ‬و سود‭ ۰/۱ ‬و سدیم دی دسیل سولفات آلودگی زدایی گردید. و سپس میزان‭ ۱۰۰ ‬میکرولیتر ان بر روی محیط لوونشتین جانسون قرار میگرفت. ایزوله‌های جدا شده مایکوباکتریوم های غیر سلی در ابتدا توسط تست های فنوتیپیک رایج مانند پیگمانتاسیون، سرعت رشد، نیاسین و کاتالاز کمی تا مرحله قرار گیری در گروه رانیون شناسایی شدند. سپس بر اساس روش های مولکولی شامل بررسی تعیین توالی و آنالیز قطعات ژنی ‭hsp65‬ و قطعه تقریبا کامل ژن ‭16SrDNA‬ مورد بررسی قرار گرفتند. در این مطالعه تعداد‭ ۲۳ ‬ایزوله مایکوباکتریوم (‭ ۱۱ ‬درصد) از‭ ۲۱۸ ‬نمونه خاک و گرد و غبار بیمارستانی اصفهان با استفاده از تست های فنوتیپیک و روش های مولکولی شامل بررسی تعیین تالی و آنالیز قطعات ژنی ‭hsp65‬ و تعیین توالی ژن ‭16SrDNA‬ مورد شناسایی قرار گرفتند. گونه های مورد شناسایی شامل‭ ۱ ‬ایزوله م .الفنتیس،‭ ۱ ‬ایزوله م .فلاری سنس،‭ ۴ ‬ایزوله م . چلونه‌ای،‭ ۲ ‬ایزوله م .ستنسی،‭ ۱ ‬ایزوله م .ارپنسی،‭ ۱ ‬ایزوله م .آبسوس،‭ ۲ ‬ایزوله م .گوردونه،‭ ۱ ‬ایزوله م سیمیه،‭ ۱ ‬ایزوله نان کروموژنیکوم،‭ ۲ ‬ایزوله م .لنتی فلاورم،‭ ۲ ‬ایزوله م .فورچوئیتم،‭ ۱ ‬ایزوله م .دوریکم،‭ ۳ ‬ایزوله م .کمماتنسی،‭1 ‬ ایزوله م .سپاهانیکوم بودند. جداسازی و شناسایی مایکوباکتریوم های غیر سلی از منابع خاک و گرد و غبار می تواند بیان گر این موضوع باشد که کشور ما با توجه به شرایط آب و هوایی خود می تواند زیستگاه گونه های متفاوتی از مایکوباکتریوم های غیر سلی باشد. و اگر محیط را به عنوان یک منبعی از میکروارگانیسم ها برای ایجاد بیماری های غفونی در نظر بگیریم لازم است که برخورد پاتوژن های محیطی را با انسان و دیگر میزبان های حساس تخمین بزنیم. زیرا با ظهور ‭HIV‬ به طور ناشناخته‌ای نقش مایکوباکتریوم ها پررنگ تر شده است. این باکتری ها قادر به تحمل شرایط سخت محیطی می باشند بنابراین می توانند منابع بالقوه بیماری برای انسان باشند. نتایج مطالعاتی که برای جداسازی مایکوباکتریوم های غیر سلی از نمونه های بالینی در کشور ما یا نقاط دیگر جهان انجام شده است، گویای این موضوع می باشد که موارد عفونت به مایکوباکتریوم های غیر سلی در حال افزایش بوده و میزان عفونت های مربوطه بسیار فراتر از تصور عمومی دست اندرکاران بهداشت عمومی جامعه می باشد. اگر محیط را به عنوان یک منبعی از میکروارگانیسم ها برای ایجاد بیماری های عفونی در نظر بگیریم لازم است که برخورد پاتوژن های محیطی را با انسان و دیگر میزبان های حساس تخمین بزنیم .نتایج این مطالعه نشان می دهد که در محیط زیست ما در خاک و حتی گرد و غبار، تنوع بالایی از مایکوباکتریوم ها وجود دارد. که بخصوص در افراد نقص ایمنی قابل توجه می باشد. و حتی ممکن است این تنوع و فراوانی بسیار بالاتر از نتیجه این مطالعه با شد زیرا تعداد حقیقی از مایکوباکتریوم هایی که در نمونه های خاک حضور دارند می تواند بطورقابل توجه ای بالاتراز شمارش زنده مایکوباکتریوم ها در نمونه هایی که آلودگی زدایی نشده اند باشد. شناسایی گونه در مایکو باکتریومها تنها بر اساس تستهای فنوتیپیک و یا تعیین توالی ژن ‭16SrDNA‬ چندان قابل اتکا نیست. بدین منظور برای تشخیص مطمئن و کامل گونه های مایکوباکتریوم موجود در نمونه های کلینیکی و منابع مختلف محیطی بکار بردن حداقل دو روش فنوتیپی به همراه استفاده از ازمایشات بیوشیمیایی مرسوم در شناسایی اولیه این گونه ها ی میکروبی پیشنهاد میگردد
توصیفگر	:	۱. مایکوباکتری اتیپیکال.- کلیدواژه‌ها: مایکوباکتری غیر معمول
	:	مایکوباکتری عامل سل
	:	فنون تعیین نوع باکتری
	:	دی ان ا
	:	واکنش زنجیره‌ای پلیمراز
	:	انتشار عفونت
	:	آلودگی محیط زیست
	:	Mycobacterium, Atypical
	:	Mycobacterium Tuberculosis
	:	Bacteria typing Techniques
	:	DNA
	:	Polymerase Chain Reaction
	:	Cross Infection
	:	Environmental Pollution
شناسه افزوده	:	شجاعی، حسن، استاد راهنما
شناسه افزوده	:	دانشکده پزشکی