ساخت و تعیین خصوصیت سلول نوترکیب ‭HEK‬ با بیان بالای ‭a4 integrin‬

/شمسی نادری; ؛ حسین خان احمد، رسول صالحی، یوسف قیصری

خط مشی دسترسی

فارسی

X

X

جستجوی مدارک

X

تمام متن

X

منابع دیجیتالی

نام مرکز	:	دانشگاه علوم پزشکی اصفهان
نوع مدرک	:	پایان نامه فارسی
زبان مدرک	:	فارسی
شماره رکورد	:	102274
شماره مدرک	:	‭ت۱۵۱۳۸‬
شماره راهنما	:	‭QU،۴۷۵،ن۱۳۶س،۱۳۹۳‬
سرشناسه	:	نادری، شمسی
عنوان	:	ساخت و تعیین خصوصیت سلول نوترکیب ‭HEK‬ با بیان بالای ‭a4 integrin‬ [پایان‌نامه]
نویسنده	:	/شمسی نادری
استاد راهنما	:	؛ حسین خان احمد، رسول صالحی، یوسف قیصری
محل تحصیل	:	دانشکده پزشکی
سال تحصیل	:	، ‭۱۳۹۳‬
مقطع تحصیلی	:	بیوتکنولوژی پزشکی، کارشناسی ارشد
صفحه شمار	:	‮ ‭۴۸‬ص.‬: مصور، جدول، نمودار
يادداشت	:	این یک پایان نامه تحقیقاتی با شماره‭ ۳۹۲۰۲۷ ‬است
يادداشت	:	چاپی
چکيده	:	اینتگرینها پروتئنهای هترودایمر غشایی اند که در سلولهای یوکاریوتیک کتحمل تغییرات پس از ترجمه می شوند. این تغییرات مزیتی است جهت تولید صحیح نانو بادیها، مونو کلونال و پلی کلونال آنتی بادیها در مقابل این پروتئینهای سطحی و همچنین پروسه انتخاب آپتامر، از آنجایی که اکثریت آنتی بادیهای درمانی و تشخیصی، ایی توپهای سطحی را هدف قرار می دهند، پروتئنهای غشایی یوکاریوتیک مدل مناسبی به منظور تحقیقات آینده جهت مواد درمانی هستند. باکتری ‭E.Coli‬ سویه ‭Top10‬ به عنوان میزبانی برای وکتور بیانی ‭ITGA4‬ که اینتگرین آلفا-‭ ۴‬را کد می کند به کار گرفته شد. سپس پلاسمید استخراج شد و مورد هضم آنزیمی قرار گرفت تا پلاسمید خطی ایجاد شود. پس از آن سلولهای ‭HEK-293‬ با پلاسمید خطی ترنسفکت شدند و غربالگری سلولهای بیان کننده ‭ITGA4‬ پایدار انجام شد. سه کلون مجزا پس از‭ ۲۱ ‬روز از زمان ترنسفکشن ایزوله شدند‭DNA .‬ کروموزومی از سلولهای ترنسفکت شده استخراج شد. حضور ژن ‭ITGA4‬ در ژنوم ‭HEK-293‬ بوسیله ‭PCR‬ سنجش شد. علاوه بر این فلوسایتومتری برای بررسی میزان بیان اینتگرین آلفا-‭ ۴‬به عمل آمد. آنالیز فلوسایتومتری نشان داد که سلولهای ‭HEK-293‬ در سطح خود آلفا-‭ ۴‬اینتگرین را بیان نمی گنند در حالیکه‭ ۹۵ ‬درصد از سلولهای ‭HEH-293‬ ترنسفکت شده با ‭ITGA4‬ بیان متفاوتی از آلفا-‭ ۴‬اینتگرین را در سطح خود نشان می دهند که با نتایج حاصل از ‭PCR‬ تطابق دارد. در این تحقیق رده سلولی ‭HEK-293‬ با بیان پایدار اینتگرین آلفا-‭ ۴‬بوسیله روش ترانسفکشن و انتخاب مثبت با هیگرومایسین بدست آمد. از رده سلولی ‭HEK-293‬ با بیان پایدار اینتگرین آلفا-‭ ۴‬با ساختار طبیعی می توان در مطالعات و تحقیقات دارویی و زیستی استفاده نمد
توصیفگر	:	۱- نمایش ژن.- کلیدواژه‌ها: نمایش ژن
	:	اینتگرین ها
	:	گیرنده های سطح سلول
	:	Gene Expression
	:	Integrins
	:	Receptors, Cell Surface
	:	HEK293 Cells
شناسه افزوده	:	خان‌احمد، حسین، استاد راهنما
	:	صالحی، رسول، استاد راهنما
	:	قیصری، یوسف، استاد راهنما
شناسه افزوده	:	دانشکده پزشکی