بررسی کینتیک آنزیم پراکسیداز جدا شده از رزماری

منو

" بررسی کینتیک آنزیم پراکسیداز جدا شده از رزماری "
/زهرا عاقلان ؛ ضیاءالدین صمصام‌شریعت

نام مرکز	:	دانشگاه علوم پزشکی اصفهان
نوع مدرک	:	پایان نامه فارسی
زبان مدرک	:	فارسی
شماره رکورد	:	102437
شماره مدرک	:	‭ت۱۵۳۲۶‬
شماره راهنما	:	‭QU،۱۴۰،ع۲۱۶ب،۱۳۹۳‬
سرشناسه	:	عاقلان، زهرا
عنوان	:	بررسی کینتیک آنزیم پراکسیداز جدا شده از رزماری [پایان‌نامه]
نویسنده	:	/زهرا عاقلان
استاد راهنما	:	؛ ضیاءالدین صمصام‌شریعت
محل تحصیل	:	دانشکده داروسازی و علوم دارویی
سال تحصیل	:	، ‭۱۳۹۳‬
مقطع تحصیلی	:	رشته بیوشیمی بالینی، کارشناسی ارشد
صفحه شمار	:	‮د، ‭۴۹‬ ص.‬: جدول، نمودار
يادداشت	:	این یک پایان نامه تحقیقاتی با شماره‭ ۳۹۱۴۱۵ ‬است
يادداشت	:	چاپی
چکيده	:	پراکسیدازها یک گروه از آنزیم های اکسیدوردوکتاز می‌باشند که اکسیداسیون طیف وسیعی از ترکیبات فنلی را در حضور پراکسید هیدروژن به عنوان پذیرنده الکترون کاتالیز می‌کنند این آنزیم‌ها به طور گسترده‌ای در زمینه تشخیص های بالینی و آزمایشگاهی به روش ایمونواسی مورد استفاده قرار می‌گیرند. در این مطالعه پراکسیداز جدا شده از برگ رزماری طی مراحل رسوب دهی با آمونیوم سولفات و کروماتوگرافی تعویض یونی روی رزین دی اتیل آمینواتیل- سلولز به طور نسبی خالص سازی شد. خواص بیوشیمیایی این آنزیم از جمله اثر ‭pH‬، دما و قدرت یونی با استفاده از سوبسترای ‭guaiacol‬ به عنوان دهنده الکترون مورد بررسی قرار گرفت. برای بررسی ویژگی سوبسترای آنزیم پراکسیداز تخلیص شده، ثابت میکائیلیس - منتن ‭( km )‬ و حداکثر سرعت واکنش آنزیمی برای سوبستراهای ‭guaiacol‬ و ‭( TMB ) ۳/۳ ،۵/۵ TetraMethyle - Benzidine‬ توسط نمودار ‭Lineweaver- Burk‬ محاسبه شد. در این مطالعه آنزیم پراکسیداز برگ رزماری با فعالیت ویژه ‭ ۴۵۱/۹ U/mg protein‬با‭ ۹/۳ ‬مرتبه خلوص تهیه شد‭pH .‬ و درجه حرارت بهینه برای این آنزیم به ترتیب‭ ۶ ‬و‭ ۴۰ ‬درجه سانتی‌گراد مشاهده شد. اثر قدرت یونی بر روی فعالیت پراکسیداز تخلیص شده به وسیله غلظت های مختلف ‭۰/۰۵-۲ M )‬) از بافر سدیم فسفات با ‭pH‬ برابر‭ ۶ ‬مورد بررسی قرار گرفت و بالاترین فعالیت در غلظت‭ ۰/۳ ‬مولار از این بافر مشاهده شد. وزن ملکولی این آنزیم به وسیله انجام سدیم دودسیل سولفات پلی اکریل امید ژل الکتروفورز ‭ ۳۳ ( SDS- PAGE )‬کیلو دالتون محاسبه شد. به منظور بررسی ایزوآنزیم ها و همگن بودن پراکسیداز تخلیص شده ‭Native‬ پلی اکریل امید ژل الکتروفورز ‭( Native- PAGE )‬ انجام شد و یک تک باند در ژل مشاهده شد. پراکسیداز تلخیص شده از برگ رزماری در طیف گسترده‌ای از ‭pH‬ و دما پایداری بالایی را نشان داد. بنابراین باتوجه به دسترسی و رشد آسان و مقاومت بالای گیاه رزماری می‌توان آنزیم پراکسیداز آن را به عنوان یک منبع جدید و مقرون به صرفه پراکسیداز برای کاربردهای مختلف در صنایع پزشکی، مواد شیمیایی و مواد غذایی مورد استفاده قرار داد
توصیفگر	:	پراکسیداز
	:	اکسیدوردوکتازها
	:	آنزیم‌ها
	:	رزماری
	:	Peroxidase
	:	Oxidoreductases
	:	Enzymes
	:	Rosmarinus
شناسه افزوده	:	صمصام‌شریعت، ضیاءالدین، استاد راهنما
شناسه افزوده	:	دانشکده داروسازی و علوم دارویی