بررسی موتاسیون در ژنهای gyrA و parC اشریشیا کلی های مقاوم به فلوروکینولون ها در نمونه ادرار بیماران...

منو

" بررسی موتاسیون در ژنهای gyrA و parC اشریشیا کلی های مقاوم به فلوروکینولون ها در نمونه ادرار بیماران مبتلا به عفونت¬های مجاری ادراری بیمارستان الزهراء(س) اصفهان در سال 92-93 "
/ راضیه دهبانی پور ؛ جمشید فقری، حاجیه قاسمیان صفایی

نام مرکز	:	دانشگاه علوم پزشکی اصفهان
نوع مدرک	:	پایان نامه فارسی
زبان مدرک	:	فارسی
شماره رکورد	:	105551
شماره مدرک	:	‭ت۱۵۶۵۸‬
شماره راهنما	:	‭QW۱۳۸/۵،.E9،د۸۲۹ب،۱۳۹۴
سرشناسه	:	دهبانی پور‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏، راضیه
عنوان	:	بررسی موتاسیون در ژنهای gyrA و parC اشریشیا کلی های مقاوم به فلوروکینولون ها در نمونه ادرار بیماران مبتلا به عفونت¬های مجاری ادراری بیمارستان الزهراء(س) اصفهان در سال 92-93 [پایان‌نامه]
نویسنده	:	/ راضیه دهبانی پور
استاد راهنما	:	؛ جمشید فقری، حاجیه قاسمیان صفایی
محل تحصیل	:	دانشکده پزشکی
سال تحصیل	:	: ۱۳۹۴
مقطع تحصیلی	:	رشته میکروب شناسی پزشکی، کارشناسی ارشد
صفحه شمار	:	۱۰۲ص.: مصور، جدول، نمودار
يادداشت	:	این یک پایان نامه تحقیقاتی به شماره‭ ۳۹۳۱۰۸ ‬است
يادداشت	:	کتابنامه انگلیسی
چکيده	:	عفونت‌های دستگاه ادراری در تمام گروه‌های سنی ایجاد شده و از عفونت‌های باکتریایی شایع می‌باشند؛ که می‌توانند با یا بدون علائم بالینی باشند و نسبت به باکتریمی و پنومونی باکتریایی و مننژیت باکتریایی شایع‌تر است. عوارض عفونی این بیماری اپدیدیمیت، اورکیت، پروستاتیت باکتریال، آبسه پری اورترال، سنگ‌های مثانه و سنگ‌های کلیوی است.با توجه به عوارض متعدد عفونت‌های ادراری، درمان به‌موقع و مناسب آن‌ها از اهمیت ویژه‌ای برخوردار است. اشریشیاکلی شایع‌ترین عامل مولد عفونت‌های دستگاه ادراری است. مقاومت نسبت به عوامل ضد میکروبی در میان اشریشیاکلی های مولد عفونت ادراری به ‌سرعت در حال افزایش است.فلوروکینولون¬ها آنتی‌بیوتیک ارجح در شروع درمان تجربی عفونت ادراری می‌باشند اما به علت ایجاد جهش در ژن‌های gyrA و parC که کد کننده‌ی آنزیم‌های هدف فلوروکینولون¬ها هستند مقاومت چشمگیری نسبت به این عوامل ضد میکروبی به دست آورده‌اند.ازاین‌رو در این مطالعه سعی بر آن شده است تا از طریق انجام تست‌های آنتی بیوگرام الگوی مقاومت آنتی‌بیوتیکی اشریشیاکلی های مولد عفونت ادراری مشخص ‌شده و با استفاده از روش‌های مولکولی جهش‌های موجود در ژن‌های gyrA و parC در اشریشیاکلی های مقاوم به فلوروکینولون ها تعیین گردد.روش‌ها: دراین مطالعه 135 ایزوله اشریشیاکلی با استفاده از کشت روی محیط‌های تشخیصی ائوزین متیلن بلو و بلادآگار و نیز انجام تست‌های بیوشیمیایی سویه های اشریشیاکلی از نمونه‌های ادرار بیماران مبتلا به عفونت ادراری جداسازی شدند. سپس تست آنتی بیوگرام با روش Kirby-Bauer جهت تعیین مقاومت آنتی‌بیوتیکی این سویه ها انجام شد. سپس DNA ایزوله‌های مقاوم به فلوروکینولون¬ها (سیپروفلوکساسین، نورفلوکساسین، اوفلوکساسین) با روش جوشاندن استخراج گردید و واکنش PCR جهت ردیابی ژن‌های gyrA و parC انجام شد.درنهایت 13 نمونه از محصولات PCR جهت تعیین جهش‌های رخ‌داده در ژن‌های مذکور تعیین توالی شدند. نتایج به‌دست‌آمده با استفاده از نرم‌افزارهای MEGA4 و Runner Gene تحلیل گردید.نتایج:از مجموع 135 ایزوله اشریشیاکلی مورد آزمایش، 61 ایزوله (45%) مقاوم به فلوروکینولون ها بوده و همگی واجد ژن‌های gyrA و parC بودند. نتایج تعیین توالی 13 ایزوله مقاوم به فلوروکینولون ها نشان داد که همه ایزوله‌ها دارای حداقل یک جهش در ژن‌های مذکور هستند. دو ایزوله ای که تنها دارای یک جهش در کدون 83 ژن gyrA بودند، نسبت به نالیدیکسیک اسید مقاوم ولی در برابر فلوروکینولون ها حساس بودند. در سایر ایزوله‌ها جهش در ژن gyrA به‌ صورت Ser83Leu و Asp87Asn مشاهده شد و جهش در ژن parC نیز به شکل GLy78Ser و Ser80Ile و Ser80VaL و Ser80Arg و GLu84VaL مشاهده شد.بحث:با در نظر گرفتن الگوهای مقاومت آنتی‌بیوتیکی به‌دست‌آمده از تست آنتی بیوگرام، این نتیجه حاصل شد که آنتی‌بیوتیک‌های مروپنم، آمیکاسین، نیتروفورانتوئین از جمله داروهای مؤثر جهت درمان این عفونت می‌باشند. نتایج این مطالعه نشان‌دهنده‌ی میزان بالای مقاومت به فلوروکینولون¬ها در میان اشریشیاکلی¬های مولد عفونت ادراری است. نتایج به‌دست‌آمده از توالی¬یابی ژن‌های gyrA و parC در این بررسی مؤید بروز جهش‌هایی بود که باعث ایجاد مقاومت بالا نسبت به فلوروکینولون¬ها می‌گردند. این امر ممکن است ناشی از تجویز غیرمنطقی آن‌ها باشد. برای غلبه بر این مشکل، باید تجویز بی‌رویه محدود گردد و تجویز آنتی‌بیوتیک بر اساس الگوهای حساسیت میکروارگانیسم صورت گیرد
توصیفگر	:	اشریشیا کولی
	:	جهش
	:	عفونت های مجرای ادرار
	:	آزمایش کامل ادرار
	:	پیدایش باکتری در ادرار
	:	مقاومت باکتری به دارو
	:	Escherichian Coli
	:	Mutation
	:	Urinary Tract Infections
	:	Urinalysis
	:	Bacteriuria
	:	ََDrug Resistance, Microbial
شناسه افزوده	:	فقری‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏، جمشید، استاد راهنما
	:	قاسمیان صفایی‏، حاجیه، استاد راهنما