بررسی اثر رقابتی توالی‌های محل اتصال KLF1 به پروموتور ژن‌های BCL11A و β گلوبین بر القا هموگلوبین جنینی در رده سلولی K562

/ نسرین حیدری; ؛ حسین خان احمد; ؛ منصور صالحی

خط مشی دسترسی

فارسی

X

X

جستجوی مدارک

X

تمام متن

X

منابع دیجیتالی

نام مرکز	:	دانشگاه علوم پزشکی اصفهان
نوع مدرک	:	پایان نامه فارسی
زبان مدرک	:	فارسی
شماره رکورد	:	108139
شماره مدرک	:	‭ت۱۷۲۰۱‬
شماره راهنما	:	‭WH۱۷۰،ح۹۴۹ب،۱۳۹۵‬
سرشناسه	:	‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏حیدری‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏، نسرین
عنوان	:	بررسی اثر رقابتی توالی‌های محل اتصال KLF1 به پروموتور ژن‌های BCL11A و β گلوبین بر القا هموگلوبین جنینی در رده سلولی K562 [پایان‌نامه]
نویسنده	:	/ نسرین حیدری
استاد راهنما	:	؛ حسین خان احمد
استاد مشاور	:	؛ منصور صالحی
محل تحصیل	:	دانشکده پزشکی
سال تحصیل	:	: ۱۳۹۵
مقطع تحصیلی	:	کارشناسی ارشد
رشته تحصیلی	:	بیوتکنولوژی پزشکی
صفحه شمار	:	ز، ۵۱ص.: مصور، جدول، نمودار
يادداشت	:	این یک پایان نامه تحقیقاتی به شماره‭۳۹۳۳۵۳ ‬ است
يادداشت	:	کتابنامه انگلیسی
چکيده	:	مقدمه: اختلالات بتاهموگلوبین مانند بیماری بتاتالاسمی یکی از شایع‌ترین اختلالات ژنتیکی است که در اثر عدم سنتز کافی زنجیره بتاگلوبین ایجاد می شود. مطالعات نشان داده است القا هموگلوبین جنینی در بیماران باعث تخفیف علائمی می گردد که منجر به درک مکانیسم تغییر هموگلوبین جنینی به بالغین شد. در این مکانیسم، فاکتور‌های گوناگون دخیل هستند که از جمله آن‌ها می‌توان به فاکتور BCL11A که نقش اساسی در سرکوب گاما دارد و همچنین KLF1 که به توالی خاصی از پرو موترژن بتاگلوبین و BCL11A متصل می‌شود و بیان و فعالسازی هر دو ژن را بالا می‌برد اشاره نمود. هدف ما از این مطالعه ورود جایگاه‌های اتصالی KLF1 بر روی پروموترهای ژن بتاگلوبین وBCL11A به سلول‌های K562 و تمایز این سلول‌ها به گلبول قرمز به منظور افزایش هموگلوبین جنینی است. روش‌ها: پلاسمید حاوی قطعه bp192، دارای جایگاه اتصالیKLF1 بر روی پروموترهای ژن بتاگلوبین و BCL11A برای ترانسفکشن در رده سلولی K562 استفاده شد. به منظور تائید اینتگره شدن قطعه 192 در DNA ژنومی، PCR انجام شد. سلول‌ها تحت درمان با سیس‌پلاتین برای تمایز به سلول‌های اریتروئید قرار گرفتند و به روش فلوسایتومتری از نظر بیان مارکر سطحی CD235a ارزیابی شدند. سپس سلول‌های نرمال تمایز‌یافته با سلول های ترانسفکت شده تمایز‌یافته از نظر بیان ژن گاما گلوبین با روش Q-RT-PCR مورد بررسی قرار گرفتند.یافته‌ها: نتایج حاصل از PCR اینتگریشن قطعه bp1700 حاوی توالی bp192 در ژنوم سلول‌های K562 را تائید کرد. تمایز سلول‌های ترانسفکت شده با بیان 84% مارکر سطحی CD235a مورد تأیید قرار گرفت. ارزیابی سلول‌های تمایز‌یافته ترانسفکت نشده و تمایز یافته ترانسفکت شده بیان 4 برابری ژن گاماگلوبین در سلول‌های ترانسفکت شده نسبت به ترانسفکت نشده را نشان داد.نتیجه‌گیری: نتایج به دست آمده از این مطالعه نشان داد که قرار‌گیری توالی های کاذب حاوی جایگاه‌های اتصالی KLF1 بر روی ژن‌های BCL11A و بتاگلوبین در سلول‌های K562 پس از تمایز، قادر به افزایش قابل توجهی در بیان ژن گاما‌‌‌گلوبین در سلول‌های ترانسفکت شده نسبت به ترانسفکت نشده گردید. نتایج حاصل از این تحقیق می‌تواند در تحقیقات آتی برای درمان بیماری‌های بتا‌تالاسمی و کم‌خونی داسی شکل مورد توجه قرار گیرد
توصیفگر	:	تالاسمی بتا
	:	هموگلوبین جنین
	:	ژن ها
	:	ژن درمانی
	:	گاماگلوبولین ها
	:	Fetal Hemoglobin
	:	Beta- Thalassemia
	:	Genes
	:	Gene Therapy
	:	Transcription Factors
	:	Carrier Proteins
شناسه افزوده	:	‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏خان احمد‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏، حسین، استاد راهنما
	:	‏‏‏‏‏‏صالحی‏‏‏‏‏‏‏‏، منصور، استاد مشاور
عنوان ترجمه شده توسط فهرست نویس	:	Attempt to reactivate γ-globin gene by introducing a gene construct containing KLF1 binding sites to the K562 cell line