زبان متن نوشتاري يا گفتاري و مانند آن
|
:
|
فارسی
|
نوع ماده
|
:
|
طرح تحقیقاتی/ پروژه فارسی
|
شماره شناسایی
|
:
|
51262
|
شماره مدرک
|
:
|
ط۲۹۷۹
|
نام شخص به منزله سر شناسه - (مسئوليت معنوي درجه اول )
|
:
|
پورحسین، معراج، مجری طرح
|
عنوان و نام پديدآور
|
:
|
کلونینگ ژن مولد- L آسپاراژینازErwinia carotovora و بیان آن درE. coli و بهینه سازی تولید و تخلیص آسپاراژیناز نوترکیب [طرح تحقیقاتی]/ معراج پورحسین؛ همکاران طرح: حسن کربکندی، مهران میراولیایی
|
وضعيت نشر و پخش و غيره
|
:
|
اصفهان: دانشگاه علوم پزشکی اصفهان ، معاونت پژوهشی و فناوری ، ۱۳۹۱.
|
مشخصات ظاهري
|
:
|
۵۷ص.: مصور، جدول
|
يادداشتهاي مربوط به نشر، بخش و غيره
|
:
|
چاپی
|
يادداشتهاي مربوط به خلاصه يا چکيده
|
:
|
- L آسپاراژیناز(EC. 3. 5. 1. 1) یک آنزیم هیدرولاز تترامر با وزن مولکولی متفاوت است که به عنوان دارو در درمان لوسمی حاد لنفوسیتی(ALL) بخصوص در بچه ها مورد استفاده قرار میگیرد و از لحاظ مصرف بالینی، موفق ترین آنزیم درمانی سرطان است. این آنزیم بیش از ۳۵ سال است که بعنوان یک مادة درمانی بر علیه لوسمی لنفوبلاستیک شدید(ALL) ، بیماری هوچکین، لوسمی میلوسیستیک حاد، لوسمی میلومونوسیتیک حاد، لوسمی لنفوسیتیک مزمن، لنفوسارکوما، رتیکولوسارکوما و ملانوسارکوما مورد استفاده قرار می گیرد. این ماده بصورت ترکیبی با دیگر داروها در درمان القایی مورد استفاده قرار گرفته و در مراحل بعدی استفاده از آن جهت کمک به ادامه درمان کاربرد داردDNA . باکتریEr. Carotovora پس از رشد براساس روش استاندارد استخراج شدRussell ) و( Sambrook سپس واکنشهایPCR با استفاده از پرایمرهای طراحی شده با30 تکرار انجام شد. محصولPCR پس از تخلیص و برش توسط آنزیمهای محدود کننده در وکتورpET 22b وارد شد .جهت تائید ادغام ژن آسپاراژیناز، از روشهای برش دادن و آزاد نمودن قطعه ادغام شده و همچنین سکوانس نمودن استفاده شد . در این تحقیق پلاسمید نوترکیب ایجاد شده به سلولهای باکتریاییXL1 Blue (Stratagene) بمنظور آزمایشات متعاقب کلونینگ انتقال داده شد و از سلولهای باکتریاییE. coli BL21 (DE3) برای بیان حداکثری( Over expression ) ژنهای کلون شده در داخل وکتورهایpET استفاده شد. کلنی های رشد نموده در حضور آنتی بیوتیک بعنوان کلونهای موفق برای مراحل بعدی استفاده خواهند شدپروتئین مورد نظر پس از کلون سازی موفق پس از خالص سازی در حد محدود و یافتن بهترین شرایط تخلیص با موفقیت خالص سازی گردید .بدنبال خالص سازی موفقیت آمیز ال-آسپاراژیناز مورد نیاز و با توجه به مقادیر قابل توجه پروتئین تولید شده که حتی در مقادیر بسیار خالص قابل رویت در ژل های رنگامیزی شده با رنگ کوماسی بلو نیز قابل رویت بود و با توجه به اینکه در دو سال اخیر توجه زیادی به کریستالیزه نمودن این پروتئین معطوف شده است ما نیز تصمیم گرفتیم که بدنبال فراهم نمودن مقدمات انجام آن باشیم ولی از آنجایی که این مرحله و هزینه های مربوطه در طرح حاضر دیده نشده بود پروتئین تخلیص شده در شرایط مناسب تا زمان فراهم شدن چنین امکانی نگهداری شده است
|
اصطلاحهاي موضوعي کنترل نشده
|
:
|
آنزیمها
|
|
:
|
داروهای ضد نورویش
|
|
:
|
اشریشیاکولی
|
|
:
|
آزمایشهای آنزیمی
|
|
:
|
Enzymes
|
|
:
|
Antineoplastic Agents
|
|
:
|
Escherichia Coli
|
|
:
|
Enzymes Tests
|
|
:
|
Aspargine
|
|
:
|
Erwinia
|
نام شخص - ( مسئوليت معنوي درجه دوم )
|
:
|
کربکندی، حسن ، همکار طرح
|
|
:
|
میراولیایی، مهران ، همکار طرح
|
نام تنالگان - (مسئوليت معنوي درجه دوم )
|
:
|
دانشگاه علوم پزشکی اصفهان ، معاونت پژوهشی و فناوری
|
مبدا اصلي
|
:
|
IRدانشگاه علوم پزشکی اصفهان
|
وضعيت انتشار
|
:
|
p
|
مجری طرح(حقیقی)
|
:
|
معراج پورحسین
|
منبع تامین اعتبار
|
:
|
معاونت پژوهشی و فناوری
|
کد پروژه
|
:
|
۱۸۵۱۲۵
|
تاریخ اتمام
|
:
|
1391/12/01
|
تاریخ شروع
|
:
|
1385/01/01
|