مطالعه بیان ژن‌های کد کننده آنزیم های تولید کننده پلیمرهای پلی هیدروکسی آلکانوات باکتری سودوموناس آئ...

منو

" مطالعه بیان ژن‌های کد کننده آنزیم های تولید کننده پلیمرهای پلی هیدروکسی آلکانوات باکتری سودوموناس آئروجینوزای‭PTCC 1310‬ و بررسی شرایط تولید این پلیمرها "
/ داریوش عابدی

زبان متن نوشتاري يا گفتاري و مانند آن	:	فارسی
نوع ماده	:	طرح تحقیقاتی/ پروژه فارسی
شماره شناسایی	:	51280
شماره مدرک	:	‭ط۳۰۱۲‬
نام شخص به منزله سر شناسه - (مسئوليت معنوي درجه اول )	:	عابدی، داریوش، مجری طرح
عنوان و نام پديدآور	:	مطالعه بیان ژن‌های کد کننده آنزیم های تولید کننده پلیمرهای پلی هیدروکسی آلکانوات باکتری سودوموناس آئروجینوزای‭PTCC 1310‬ و بررسی شرایط تولید این پلیمرها [طرح تحقیقاتی]/ داریوش عابدی؛ همکاران طرح: حمید میرمحمد صادقی، علی جهانیان نجف آبادی، سعید موحدی، مونا معلومی
وضعيت نشر و پخش و غيره	:	اصفهان : دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، معاونت پژوهشی ، ‭۱۳۸۹‬.
مشخصات ظاهري	:	‮‭۶۹‬ص.‬: مصور، جدول، نمودار
يادداشتهاي مربوط به نشر، بخش و غيره	:	چاپی
يادداشتهاي مربوط به خلاصه يا چکيده	:	در طول سالیان گذشته استفاده از پلاستیک‌ها مشکلاتی را در چگونگی دفع آنها ایجاد نموده است یک راه کار برای کاهش ضایعات پلاستیکی استفاده از پلاستیک‌های زیست تخریب پذیر است. گروهی از این پلاستیک‌ها، پلی هیدروکسی آلکانوات هستند. تاکنون‭ ۲۵۰ ‬میکروارگانسیم مختلف شناسایی شده‌اند که می‌توانند‭PHA‬ را سنتز و ذخیره نمایند اغلب گونه‌های سودوموناس قادر به ذخیره‭mcl-PHA‬ هستند. در طرح‌های قبلی‭phaC1‬ و‭phaC2‬ از‭pseudomonas aeroginosa PTCC 1310‬ شناسایی و کلون شده است در این طرح به دنبال بیان ژن‌ها و بهینه‌سازی شرایط تولید آنها هستیم. از کشت شبانه کلنی‌های تازه ترانسفورم شده کشت جدید تهیه گردید و پس از رسیدن به‭OD600‬ مناسب(‭۰/۴-۰/۶ ‬) با افزودن‭IPTG‬ بیان ژن القاء گردید نمونه‌های حاصل از القاء قبل و بعد از تخلیص توسط رزین نیکل توسط روش‭SDS-PAGE‬ مورد ارزیابی قرار گرفتند، پس از تایید بیان پروتئین‌های مورد نظر بهینه‌سازی بیان ژن بر اساس سه عامل دما، زمان و غلظت‭IPTG‬ صورت گرفت. میزان بیان در نمونه‌ها به روش‭SDS-PAGE‬ توسط نرم‌افزار‭photocapt‬ به صورت کمی در آمد و مورد تجزیه و تحلیل آماری قرار گرفت. نتایج: با القا بیان ژن توسط‭IPTG‬ باندی در‭ ۶۲ KD‬بدست آمد که با‭phaC1‬ و‭phaC2‬ مطابقت داشت و پس از خالص سازی توسط رزین نیکل نیز تنها یک باند در همین ناحیه بدست آمد. براساس نتایج حاصل از‭SDS-PAGE‬ بیشترین بیان در دمای‭ ۳۷ ‬درجه سانتیگراد و بعد از‭ ۲ ‬ساعت القاء توسط‭IPTG‬ با غلظت‭ ۱ mM‬صورت گرفت. بحث و نتیجه‌گیری: استفاده از گونه‌های موتان‌دار‭E.coli‬ جهت بلوک مسیر اکسیداسیون اسید چرب و تولید بیشتر‭PHA‬ توصیه می‌گردد، از سوی دیگر بیان هم زمان‭PHA‬ سنتاز و دیگر آنزیم‌های دخیل در تولید پیش‌سازهای مورد نیاز برای تولید‭PHA‬ منجر به افزایش تولید آن می‌شود. بایستی در تعیین شرایط بهینه واقعی، عواملی همچون هزینه انجام کار و زمان نیز در نظر گرفته شود
اصطلاحهاي موضوعي کنترل نشده	:	بیان ژنی
	:	سودوموناس آئروجینوزا
	:	اشریشیاکولی
	:	آنزیم ها
	:	Gene Expression
	:	Pseudomonas Aeruginosa
	:	Escherichia Coli
	:	Enzymes
	:	Polyhydroxyalkanoates
نام شخص - ( مسئوليت معنوي درجه دوم )	:	میرمحمد صادقی، حمید ، همکار طرح
	:	جهانیان نجف آبادی، علی ، همکار طرح
	:	موحدی، سعید ، همکار طرح
	:	معلومی، مونا، همکار طرح
نام تنالگان - (مسئوليت معنوي درجه دوم )	:	دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، معاونت پژوهشی و فناوری
مبدا اصلي	:	IRدانشگاه علوم پزشکی اصفهان
وضعيت انتشار	:	p
مجری طرح(حقیقی)	:	داریوش عابدی
منبع تامین اعتبار	:	معاونت پژوهشی و فناوری
کد پروژه	:	‭۱۸۵۰۸۵‬
تاریخ اتمام	:	‭1389/01/01‬
تاریخ شروع	:	‭1385/01/01‬