تولید و تخلیص توکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپ‭E ‬ و تولید آنتی‌توکسین علیه آن

منو

" تولید و تخلیص توکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپ‭E ‬ و تولید آنتی‌توکسین علیه آن "
/محمدابراهیم مینایی ؛ علی فاضلی، اکبر طبیبیان، مجتبی سعادتی

نام مرکز	:	دانشگاه علوم پزشکی اصفهان
نوع مدرک	:	پایان نامه فارسی
زبان مدرک	:	فارسی
شماره رکورد	:	96969
شماره مدرک	:	‭ت۸۹۱۴‬
شماره راهنما	:	‭.C5QW،۱۲۷/۵،.C5،م۹۸۴ت،۱۳۸۲‬
سرشناسه	:	مینایی، محمدابراهیم
عنوان	:	تولید و تخلیص توکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپ‭E ‬ و تولید آنتی‌توکسین علیه آن [پایان‌نامه]
نویسنده	:	/محمدابراهیم مینایی
استاد راهنما	:	؛ علی فاضلی، اکبر طبیبیان، مجتبی سعادتی
محل تحصیل	:	دانشکده پزشکی
سال تحصیل	:	، ‭۱۳۸۲‬
مقطع تحصیلی	:	رشته میکروب‌شناسی، کارشناسی ارشد
صفحه شمار	:	‮ ‭۱۱۴‬ص.‬: مصور، جدول، نمودار
يادداشت	:	پایان‌نامه قبلا بعنوان طرح تحقیقاتی با شماره‭ ۸۱۱۳۷ ‬ارائه شده است
يادداشت	:	چاپی
چکيده	:	نوروتوکسین‌های بوتولینوم توسط باسیهای گرم مثبت بی هوازی و اسپوردار باکتری کلستریدیوم بوتولینوم تولید می‌شود. توکسین بوتولینوم یک عامل بلوکه کردن عصبی عضلاتی بسیار قوی است که باعث ایجاد فلج از طریق ممانعت آزاد شدن استیل کولین از انتهای اعصاب محیطی می‌شود. نوروتوکسین‌ها به صورت یک پلی‌پپتید تک زنجیره‌ای سنتز می‌شوند که تقریبا دارای وزن مولکولی‭ ۱۵۰ ‬کیلو دالتون هستند. در این حالت مولکول توکسین بوسیله حداقل یک باند دی‌سولفیدی درون زنجیره‌ای و همچنین دارا بودن توکسیستی نسبتا پایین مشخص می‌شود. موقعی که این مولکول پیش‌ساز در معرض آنزیم تریپسین یا شبه تریپسین‌ها قرار گیرد، به مولکول دو زنجیره‌ای شکسته می‌شود. زنجیره سنگین ‭ ۱۰۰)‬کیلو دالتون) و زنجیر سبک ‭ ۵۰)‬کیلو دالتون) بوسیله یک باند دی‌سولفیدی بین زنجیره‌ای به هم مرتبط هستند. سویه‌های کلستریدیوم بوتولینوم به هفت گروه ‭(A- G)‬ بر اساس ویژگی آنتی‌ژنیکی توکسین‌های تولید شده طبقه‌بندی می‌شوند. به طور کلی این پایان‌نامه در‭ ۴ ‬مرحله ذیل انجام شده است: تولید توکسین،‭۲ ‬- تخلیص توکسین،‭۳ ‬- تبدیل توکسین به توکسوئید،‭۴ ‬- تولید آنتی‌توکسین. باکتری کلستریدیوم بوتولینوم تیپ‭E ‬ در‭ ۸ ‬لیتر محیط کشت ‭TPYG‬ رشد داده شد. روشهای تخلیص نوروتوکسین بوتولینوم شامل یکسری مراحل رسوب دادن و سانتریفوژ است که بوسیله کروماتوگرافی ‭HPLC‬ ادامه می‌یابد. توکسین بدست آمده از محیط کشت در حجم کمی از بافرسیتریک تغلیض شده سپس این عصاره از ستون کروماتوگرافی ‭CM- Sepharose, DEAE sephadex A-50‬ عبور داده شد. سمیت ویژه توکسین تخلیض شده با روش ‭Kaeber‬ محاسبه شد. توکسین با افزودن‭ ۲۰ ‬درصد فرمالین به توکسوئید تبدیل و در دمای‭ ۳۲ ‬درجه سانتی‌گراد نگهداری شد. توکسوئید از نظر توکسیسیتی با تزریق به موش تست شد. بعد از‭ ۴ ‬روز توکسین به توکسوئید تبدیل شده بود و موشها زنده ماندند. جهت تولید توکسین، توکسوئید به خرگوش و مرغ تزریق شد. افزایش آنتی‌بادی در سرم حیوان آزمایشگاهی از طریق تکنیک الیزا بررسی گردید.
توصیفگر	:	۱- کلستریدیوم بوتولینوم.- کلیدواژه‌ها: باکتری‌های بی‌هوازی
	:	بوتولیسم
	:	مسمومیت غذایی
	:	مدفوع
	:	بافت مردگی
	:	باکتری‌ها
	:	عفونتهای کلستریدیومی
	:	پادرزهرها
	:	Bacteria, Anaerobic
	:	Botulism
	:	Food Poisoning
	:	Feces
	:	Necrosis
	:	Bacteria
	:	Botulinum Antitoxin
	:	Clostridium Infection
	:	Antitoxins
شناسه افزوده	:	فاضلی، علی، استاد راهنما
	:	طبیبیان، اکبر، استاد راهنما
	:	سعادتی، مجتبی، استاد راهنما
شناسه افزوده	:	دانشکده پزشکی